离子交换色谱仪品牌排行榜 全是干货丨离子交换色谱（IEC）原理、操作要点及应用

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本文目录一览：

• 1、全是干货丨离子交换色谱（IEC）原理、操作要点及应用
• 2、离子交换色谱法简介
• 3、SP 离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus产品特性

全是干货丨离子交换色谱（IEC）原理、操作要点及应用

离子交换色谱（IEC），这个强大的分离技术，以其独特的原理和广泛应用吸引着科学家们的目光。其核心在于利用离子交换剂的离子交换特性，通过离子间的电荷作用力差异进行高效分离。离子交换剂由基质、电荷基团和反离子构成，分为阳离子和阴离子两种类型，每个种类的选择性都由平衡常数K和亲和力参数如离子电荷、电价和原子序数决定。

离子交换过程是一个可逆的动态过程，其结合力受到pK值和等电点的影响。在蛋白质分离中，等电点原理与盐梯度或pH梯度结合，使得洗脱成为关键步骤。离子交换树脂的孔状结构，无论是疏水性树脂（如强酸-弱酸-弱碱树脂）还是亲水性树脂（如纤维素和交联葡聚糖），都为离子迁移提供了有利条件，但选择时需针对样品特性来决定。

在实际操作中，离子交换剂的选择至关重要，如阳离子交换剂针对正电荷物质，阴离子交换剂针对负电荷，或者针对两性离子的特定pH范围。强型交换剂适用于广泛的pH范围，而弱型则在中性pH条件下保持高交换容量。强酸树脂对于碱性蛋白质尤其有效，反离子的选择则取决于结合力，强酸型选择H型，弱酸型选择Na型。

预处理和再生转型是维持树脂性能的关键环节，可能包括树脂浸泡、除杂质（酸碱处理）以及再生步骤。亲水性树脂可能需要使用NaOH/NaCl或HCl处理，而琼脂糖则可通过酸碱浸泡处理。装柱时，柱高与直径的比例、离子强度都会影响分离效果，装柱需均匀分布，避免气泡产生。样品上柱时，平衡缓冲液是基础，随后均匀加入，洗脱则需要精细设计，通过分段、梯度或复合方法提高分辨率。

质处理时，亲水性树脂采用乙醇或丙酮，酸碱处理用于琼脂糖。收集洗脱液时，应控制流速，分步收集以确保单一物质的纯度。确定洗脱液流速时，通常在5~8cm³/(cm²-h)范围内实验，收集1%~2%柱体积的洗脱液，通过监测吸光度绘制洗脱曲线。离子交换色谱在蛋白质纯化（如绿豆几丁质酶）和等电点测定（如饭豇豆凝集素）等领域表现出色，凭借其高灵敏度和重复性，成为科学家们的得力工具。

总的来说，离子交换色谱通过精密的操控和策略性应用，为科学家们提供了一种强大的工具，用于精细分离和分析复杂的生物分子，是现代生物化学和分子生物学实验室中的必备技术。

离子交换色谱法简介

离子交换色谱法（Ion Exchange Chromatography, IEC），一种起源于20世纪70年代并于80年代迅速发展的高效分析手段，特别适用于无机化合物，特别是无机阴离子的混合物分析。

该方法基于一个基本原理，即被分离的化合物与其固定相之间通过离子交换作用实现分离。固定相的核心是离子交换树脂，其分子结构中分布着许多可电离的活性位点。在分离过程中，待分析组分中的离子会与这些活性位点发生离子交换，形成一个动态的离子交换平衡。在这个平衡状态下，待分离离子与固定相中的固有离子竞争占据交换中心，随着流动相的移动，这种竞争导致它们在流动相和固定相之间发生相对移动，从而实现了有效的分离。

扩展资料

离子交换色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法。凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离。现在它不仅适用于无机离子混合物的分离，亦可用于有机物的分离，例如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子，因此应用范围较广。

SP 离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus产品特性

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SP离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus

SP离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus是强阳离子交换色谱填料，性能优于IEX SepFast HighRes。它适用于生物工艺应用，具有高分辨率和高载量，特别适用于高通量、低成本的困难分子纯化过程。

核心优势包括高流速下的高样品载量以及高载量下的高分辨率。基础基质由高度交联的琼脂糖和葡聚糖制成，具有出色的流动性，对生物加工行业中的大多数化学条件都很稳定。

产品特性涉及优化载量、流速、结合pH值、结合离子强度、洗脱速度和梯度。SP离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus的快速孔隙可及性允许结合步骤在比洗脱步骤更快的流速下完成。建议优化洗脱条件以实现最佳分离能力。

强离子交换色谱填料在宽pH范围内保持其电荷，弱离子交换色谱填料的离解程度和离子交换容量随pH值变化。因此，优化pH值在使用弱离子交换色谱填料时尤为重要。

在优化方法时，平衡组分分离度与工艺产量是关键考虑因素。对于不稳定或对剪切力敏感的分子纯化，需要在产量与对目标分子可能造成的损害之间找到平衡。

装柱方面，SP离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus由高度交联的珠状琼脂糖制成，具有出色的机械强度，易于填充到任何类型的色谱柱中，典型的包装压力可达3 bar。

保养包括再生、就地清洗(CIP)和消毒。再生后，使用高离子强度溶液或增加pH值进行清洗。CIP有助于去除残留的脂质、内毒素和变性蛋白质，频率取决于应用性质。消毒通常使用0.5-1.0 M NaOH接触1 h。

储存时，SP离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus应存放在20%乙醇中，防止微生物生长。推荐在4℃至30℃的温度下存储，并在使用前用至少5倍体积的运行缓冲液平衡。

更多信息可查阅相关文档或制造商指南，以获取详细操作指南和技术支持。 搜视网

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